AB-PAS染色實(shí)驗(yàn)代測(cè)

AB-PAS染色簡(jiǎn)介：

某些細(xì)胞如胃腸的杯狀細(xì)胞能分泌粘稠的分泌物，含有大量的糖稱(chēng)粘多糖。中性粘液物質(zhì)含有氨基己糖和游離的己糖基，酸性粘液物質(zhì)也含有氨基己糖并含有各種酸根。此方法先染阿利新藍(lán)染酸性粘液物質(zhì)為藍(lán)色，并阻斷酸性粘液物質(zhì)的羧酸分子中的乙二醇被高碘酸氧化生物試劑二醛而著紅色。只有中性粘液物質(zhì)的乙二醇基被高碘酸生成二醛后與雪夫試劑中的無(wú)色品紅作用生成紅紫色復(fù)合物。

染色實(shí)驗(yàn)步驟（僅供參考）：

1、切片脫蠟至水。

2、阿利新藍(lán)染液浸染或滴染5-10min。稍水洗。

3、0.5%高碘酸水溶液氧化5-10min。

4、流水沖洗數(shù)分鐘蒸餾水換洗兩次。

5、雪夫試劑暗處浸染或滴染15~30min。

6、流水沖洗5-10min。  

7、蘇木素復(fù)染核1min左右，鹽酸酒精分化，氨水返藍(lán)。

8、95%酒精I(xiàn) 5min-95%酒精I(xiàn)I 5min-無(wú)水乙醇I 5min-無(wú)水乙醇II 5min脫水，二甲苯透明中性樹(shù)膠封固。（一定要濕封，在組織上的二甲苯未揮發(fā)完組織變干之前封片，否則易出現(xiàn)黑色的結(jié)晶狀物即空氣結(jié)晶）。

染色結(jié)果：

糖原、中性粘液物質(zhì)呈紅色，酸性粘液物質(zhì)呈藍(lán)色，混合性粘液物質(zhì)呈藍(lán)紫色或紫藍(lán)色，胞核呈藍(lán)色。

注意事項(xiàng)：

1、高碘酸溶液為透明溶液，長(zhǎng)時(shí)間染色如果沒(méi)有帶入雜質(zhì)的話(huà)此溶液一直是透明的，所以無(wú)法從常規(guī)的顏色辨別高碘酸的好壞，只有定期更換，根據(jù)標(biāo)本的多少1~2月更換一次。

2、雪夫試劑要放入冰箱保存，臨用前半小時(shí)取出恢復(fù)至室溫，用后又倒回原瓶?jī)?nèi)放冰箱保存；雪夫試劑出現(xiàn)淡紅色就不能繼續(xù)使用了。

3、如果沒(méi)有要求，可以不染核，要染核的話(huà)染色一定要淺。因?yàn)樗嵝哉骋何镔|(zhì)著藍(lán)色，如果核藍(lán)色太深對(duì)比不明顯。

4、一定要先染阿利新藍(lán)后染PAS，否則藍(lán)色著染少而淺結(jié)果不準(zhǔn)確，原因是酸性粘液物質(zhì)的羧酸分子中的乙二醇被高碘酸氧化生物試劑二醛與雪夫試劑中的無(wú)色品紅作用生成紅紫色復(fù)合物后再難跟阿利新藍(lán)結(jié)合。

AB-PAS染色實(shí)驗(yàn)代測(cè)